ПГД при ЭКО

Преимплантационная генетическая диагностика – это комплекс мер, направленный на повышение успешности оплодотворения и позволяющий выявить огромное количество отклонений появляющихся в ходе развития плода. ПГД проводится на этапе еще до подсадки эмбриона в матку. Для осуществления процедуры специалист делает биопсию делящегося бластомера эмбриона и отправляет полученный биоматериал в лабораторию. Обычно процедура назначается при наличии высоких рисков появления врожденных генетических патологий.

При помощи ПГД можно своевременно выявить генные отклонения и дать прогноз дальнейшему развитию плода. Информация, полученная при проведении исследования обычно подтверждается в 95% случаев. Процедура осуществляется в рамках цикла ЭКО по рекомендации врача или по желанию самой пациентки.

Зачем нужно ПГД обследование

ПГД обследование проводится преимущественно с целью уменьшения вероятности рождения наследника-носителя генной аномалии у родителей, страдающих генными/хромосомными заболеваниями. Обследование позволяет:

• Увеличить успешность ЭКО процедуры благодаря отбору эмбрионов с аномалиями кариотипа. Такой вид патологии выявляется больше чем у 50 процентов эмбрионов женщин старшего возраста или с плохим прогнозом ЭКО (в анамнезе больше 2-3 самопроизвольных прерываний беременности, больше двух-трех не удавшихся попыток IVF/ICSI).
• Выявить носителей с генетической предрасположенностью к таким сложнейшим заболеваниям как Альцгеймер, онкология и пр.
• Сделать HLA типирование эмбрионов, чтобы подобрать донора аналогичного по лейкоцитарному антигену для больного брата/сестры.
• Определить пол будущего малыша для предотвращения передачи дефектов, сцепленных с определенным полом.

ПГД моногенных заболеваний рекомендуется для выявления: муковисцидоза, серповидно-клеточной анемии, гемофилии, миодистрофии Дюшена и пр. Проводится исследование 9 хромосомных аномалий, являющихся первопричиной синдромов Дауна, Патау, Шерешневского-Тернера. Также метод позволяет определить прочие патологии, которых насчитывается около 150.

Основные методы проведения ПГД

Для проведения ПГД можно брать эмбрионы или яйцеклетки. Исследование эмбрионов является более информативным, потому что зародыш содержит генный материал отца, через которого также могут быть переданы дефектные гены. Использовать такую технологию можно лишь в процедуре ЭКО. Это является гарантией того, что в исследовании не будет использован сперматозоид, не принявший участия в оплодотворении.

Существует несколько способов проведения ПГД:

• FISH применяется для исследования наличия числовых или структурных дефектов хромосом. Биопсийная клетка сначала нагревается, потом охлаждается. Её оболочка при этом разрывается и цитоплазма расплывается наружу. Сегменты ДНК окрашиваются флуоресцентными красителями. В высокоточном микроскопе подсчитываются нормальные и патологически измененные хромосомы. Метод является наиболее доступным по цене. У него есть один недостаток - с его помощью нельзя проверить абсолютно все хромосомы.
• Метод ПЦР. Копии ДНК денатурируют, нить раскручивается и получается один фрагмент. Методом ферментирования умножается количество генного материала, в котором ищутся поломанные сегменты. Эта техника применяется для определения моногенных болезней, когда супруги являются носителями поломанных генов.
• Метод NGS - высокопроизводительное секвенирование, являющееся самой инновационной диагностикой. Метод позволяет в криоцикле исследовать все пары хромосом. Точность метода достигает 99,9%. Исследуются моногенные и хромосомные патологии и мутации.

Когда применятся ПГД диагностика при ЭКО

У пар, имеющих вышеперечисленные патологии или являющихся носителями таких генов, есть 2 пути выносить здорового ребенка: выявлять дефект плода во время беременности методом анализа околоплодных вод или на УЗИ во время скрининга или заранее делать диагностику, чтобы перенести в маточную полость заведомо здоровый эмбрион.

Показаниями для проведения процедуры является:

• наличие наследственных болезней у будущих родителей, их существующих детей и их родственников;
• наличие замершей беременности или больше 2 выкидышей в анамнезе;
• больше 2 неудавшихся попыток ЭКО;
• нарушения спермограммы;
• возраст будущей матери - больше 35, возраст мужчины - больше 39;
• вероятность резус-конфликта;
• предрасположенность к онкологическим болезням;
• HLA-типирование эмбриона при онко-гематологических патологиях.

Благодаря ПГД можно отобрать для подсадки в маточную полость только качественные эмбрионы без поломок, чем существенно снизить риск возникновения генных заболеваний.

Этапы проведения ПГД

На пятые сутки, когда начинается деление уже оплодотворённой яйцеклетки до бластомеров, один из них забирается для исследования. Манипуляция никоим образом не препятствует дальнейшему развитию эмбриона, так как абсолютно все клетки являются абсолютно одинаковыми на этой стадии развития. В некоторых случаях биопсийный забор проводится на третьи сутки.

Если какой-либо супруг является носителем моногенных патологий (мутация одного гена) или наблюдается перенос участка одной хромосомы на другую, перед вступлением пары в протокол ЭКО потребуется сделать анализ кариотипа и сходить к генетику. Во всех остальных случаях потребуется сдать кровь из вены обоим будущим родителям в день пункции фолликулов.

Подготовка и цикл ЭКО с ПГД ничем не отличается от стандартного цикла ЭКО:

• проводится стимуляция суперовуляции;
• осуществляется трансвагинальная пункция фолликулов;
• в эмбриологической лаборатории производится оплодотворение яйцеклеток;
• на 5-6 сутки эмбрионы транспортируются в матку.

Анализ должен быть выполнен в сжатые сроки, так как анализ бластомеров должен быть проведен за двое суток. В дальнейшем бластомер перестает развиваться вне женского организма. Намного больше возможностей у диагностики в цикле с криоконсервацией. В этом случае можно провести биопсию нескольких эмбрионов, их консервировать и выполнить максимум исследований. Подсадка нормального здорового эмбриона выполняется на следующий цикл.

Достоинства и недостатки процедуры

Достоинства ПГД:

• высокая чувствительность и достоверность;
• исследование качества эмбриона до его подсадки в маточную полость;
• широкий спектр генных патологий, которые выявляются;
• отбор генетически качественных эмбрионов;
• уменьшение вероятности невынашивания беременности (риск выкидыша у возрастных пар снижается со стандартных 36,5-44,5% до 12-16,7%);
• снижение до минимального риска рождения малыша с врождённой и наследуемыми патологиями;
• уменьшает риск многоплодности.

Еще одним достоинством процедуры можно назвать то, что ПГД не нарушает ЭКО протокола, все стадии которого осуществляются как обычно. Родилось уже достаточно много детей, которые не страдают семейными заболеваниями и могут не опасаться их развития в старшем возрасте, благодаря ПГД, что является неоспоримым свидетельством эффективности, надежности и необходимости диагностической технологии.

К недостаткам ПГД можно отнести только пусть мизерный, но все-таки присутствующий риск технической ошибки, а также высокую стоимость процедуры, ограничивающую её проведение для более широкого сегмента семейных пар.

Результаты ПГД

После проведения ПГД супруги получают на руки результаты диагностики, в которых имеется исчерпывающая информация об эмбрионе, клетки которого были исследованы в лаборатории. В результатах диагностики также содержится информация о наличии/отсутствии мутации у эмбриона и рекомендации к подсадке. Полученные результаты необходимо обсудить с ПГД-консультантом или репродуктологом.

Стоимость услуги

Для проведения ПГД необходима специализированная аппаратура и дорогостоящие расходные материалы, поэтому процедура является дорогостоящей и, к сожалению, пока не для всех родителей доступной. Также исследование проводят только специалисты высокого уровня. Зависит цена ПГД и от вида исследования и от количества эмбрионов, которые планируют проверить будущие родители. Заказать обследование ПГД можно как по одной патологии, по нескольким или же провести диагностику на все патологии.